培养基采购指南

培养基(Medium）是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、**素、色素、**和血清等）等。

什么是培养基

培养基(Medium）是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。

培养基的组成

一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、**素、色素、**和血清等）等。

培养基的作用

培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。

培养基的分类

（1）按照配置原料来划分，分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基。

（2）按照物理状态来划分，分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基。

（3）按照营养成分来划分，分为基本培养基（*低限度培养基)、完全培养基（血清细胞培养基)、补充培养基。

（4）按照微生物种来划分，分为**培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、霉菌培养基。

（5）按照用途来划分，分为基础培养基、加富培养基、选择培养基、鉴别培养基。

培养基分类详解

根据配制原料分类

天然培养基

利用动物、植物或微生物体（包括其提取物）制成

难以确切知道其化学成分，但一般营养丰富，微生物生长旺盛，而且来源广泛，配制方便，所以较为常用，尤其适合于配制实验室常用的培养基和大生产上的培养基。稳定性常受生产厂或批号等因素的影响。

合成培养基

根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成、人工设计而配制

用已知化学成分的化学药品配制而成，化学成分精确、重复性强，但价格昂贵，而微生物又生长缓慢，适用于做一些科学研究，例如营养、代谢的研究。

半合成培养基

主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分

在合成培养基中，加入某种或几种天然成分；或者在天然培养基中，加入一种或几种已知成分的化学药品即成半合成培养基。

根据物理形态分类

固体培养基

在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。

常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。

半固体培养基

在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。

可用于观察**的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。

液体培养基

不加任何凝固剂。成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料。

适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。

根据营养成分分类

基本培养基（*低限度培养基）

只能保证某些微生物的野生型菌株正常生长，是含有营养要求*低成分的合成培养基。

往往缺少某些生长因子，所以经过诱变过的营养缺陷型菌株不能生长。

完全培养基（血清细胞培养基）

基本培养基中加入血清、富含氯基酸、维生素和碱基之类的天然物质（如酵母浸出物、蛋白胨等），即加入生长因子而成完全培养基。

可用来满足微生物的各种营养缺陷型菌株的生长需要。

补充培养基

往基本培养基中有针对性加进某一种或某几种该菌株不能合成的营养因子而组成。

满足相应的营养缺陷型菌株生长的需要。

培养基的保管注意事项

（1）培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行**，通常有高温**和过滤**。

（2）培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。配好后不宜久置，*好现配现用。

（3）一般培养基在受热、吸潮后，易被**污染或分解变质，因此一般培养基**须防潮、避光、阴凉处保存。

（4）对一些需严格**的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，**须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，需制成粉末。

培养基使用常见问题解答

（1）含琼脂培养基冷却**25℃后已凝固，如何测定其pH？

答：有专门的固体培养基pH计。

（2）**后的培养基是否都要测pH值？如何测定pH值？

答：每个制备批次的培养基都应测定pH，可采用pH试纸或pH计测量。

（3）稀释液**后pH值是否有变化？有何影响？（如pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液，pH6.8无菌磷酸盐缓冲液）

答：一般pH有下降现象，约0.2左右，不同培养基pH变化可能不同。

（4）孟加拉培养基是否可以取代玫瑰红钠琼脂进行培养霉菌和酵母菌？

答：根据中*药典，采用玫瑰红钠琼脂。

（5）配制PH值7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液时有时因为高压**器**过程温度过高而导致培养基混浊了，这种情况缓冲液还能用吗？

答：建议按正常温度**，混浊培养基建议不要使用。

（6）含琼脂培养基在冷藏中形成冰晶怎么处理？销毁还是加热再用？

答：建议不要使用。

（7）融化的培养基为什么不能再冷水中冷却？

答：防止受热不均引起结块。

（8）**后，**锅需自然冷却降压才可以打开，这段时间是否会造成过度**。

答：自然冷却过程已经计算在正常**时间内了，不会造成过度**。

（9）培养基所用器具若使用湿热**，是否**须待干燥后才可以使用？若烘干或其它方法，中间过程怎样防止微生物污染？

答：如果是马上使用且不是用于非水溶性供试液的制备及实验，不一定要烘干；否则，应干燥后使用，**及干燥尽量在同一锅里进行，或用纱布和牛皮纸包扎紧密。

（10）培养基的避光储存，是否配置好的培养基其全部放避光储存？

答：*好都避光保存。无条件时，光敏感的培养基一定要。

（11）商品培养基干粉说是加蒸馏水溶解，实际操作是否可以用*化水或注射用水？

答：只要不含有任何可能抑制或影响微生物生长的物质的水均可。

（12）培养基及器具**可否同一设备同**时间进行**？

答：*好分开**，条件不允许时可同炉**，前提是都是洁净无污染的。

（13）培养基的保温能否用60℃的培养箱，它与45℃—55℃水浴锅保温方法有何不同？

答：可以用恒温培养箱保温，但保温温度一般是50℃左右，且时间不能过长，一般是不超过4小时。

（14）培养基的贮存是否需要放置于2—10℃冰箱内？

答：需冷藏保存的培养基外包装上会写明。

（15）培养基**后成份会有所蒸发减少，如何处理这个问题？

答：正常情况下蒸发量较少，可忽略不计。

（16）培养基融化后出现浑浊是有哪些方面的原因引起的？应如何避免？

答：可能的情况有培养基配置用水不符合规定、**过程温度升温慢或降温慢、 培养基储存不当、融化时沸腾时间较长等。

（17）准备好的培养基有效期如何验证？

答：定期取出培养基验证其无菌性，促生长能力等方面。

（18）培养基配制好**后，在高压容器中保温降**50℃左右，可不可行？

答：建议*好不要，避免过度受热。

（19）脱水培养基对湿度是否有要求？多少适宜？

答：按要求室温干燥环境储存即可。

（20）培养基pH值测定温度在25℃，这个温度应怎么控制？比如固体培养基，固体培养基使用过程中还能调节pH值吗？

答：可水浴控制培养基温度。

（21）配制培养基过程中，按说明书称定量，加规定的*化水，煮沸溶解，为了避免煮沸过程总减少水分，是否要在配制过程适当增加水?比如配硫乙醇酸盐流体培养基。

答：可适量增加，自己掌握。

（22）商品培养基一定要当天配当天用吗？可否在一周内用完？

答：不是即配即用的培养基的话，储存得当，可以使用。

（23）称量培养基时，注意不要吸入粉末，这粉末是指何物？

答：就是你所称量的干粉培养基 ，因为培养基的粉末对呼吸道有刺激作用，而且培养基中的某些成分，如亚硒酸盐、叠氮化钠、乙酰胺等，长期吸入并在体内累积到一定量会对人体健康有危害。所以培养基配制称量需做好个人防护，且*好选择少粉尘环保型颗粒培养基。

（24）煮培养基，用不锈钢锅在电磁炉上煮可行？硫乙醇培养基是否要煮沸？如何煮沸？用不锈钢锅在电磁炉上煮沸可行吗？可不可以水浴煮沸呢？

答：硫乙醇应煮沸，量大时，我实验室用不锈钢锅在电磁炉上煮沸。不建议水浴煮沸，因为水浴煮沸琼脂粉很难溶，导致琼脂分装不均匀，前段分装的琼脂含量少，后段分装的琼脂含量高，导致有的管或瓶中的凝固。

（25）如培养基在高压**器中温度需自然下降20度才开盖吗？

答：高温**器有**阀，温度下降到**阀可打开时将培养基取出室温冷却，各型号**器**开盖温度不尽相同。

应用场景

一般在实验室使用较多。