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微生物质谱鉴定仪操作流程

作者:春天 日期:2025-07-22 人气:20

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试剂与材料准备:需要准备微生物基质试剂盒(含A液和B液)、接种环(1μL)、微量移液器和吸头(2.5μL)等。

样本要求:待检样本**须是经培养基分离后的纯化菌落。常用的培养基包括哥伦比亚血琼脂、沙保氏葡萄糖琼脂培养基等。样本应新鲜培养,以满足鉴定准确性的要求。

样本前处理:**制备采用直涂法。使用1μL接种环挑取合适菌落,将微生物菌落涂在靶点中央位置,并摊涂均匀,形成薄层。然后用移液器滴加2μL B液,待其自然干燥后,滴加1.5μL A液于靶点正中,自然干燥,待测。操作时应戴无粉手套,避免污染。

上机检测:将制备好的靶板放入质谱仪中进行检测。需要注意的是,水分进入真空系统可能会损坏仪器,因此需待靶板完全干燥后,方可将靶板载入真空仓。

数据采集:在质谱仪中,样品通过有效的电离将不同质荷比(m/z)的离子分开形成**特异性的清晰的指纹图谱。

数据分析:通过分析关键的质谱峰数据,与数据库中的已知菌种谱图进行比对,即可快速得到**鉴定结果。质谱仪得到的鉴定结果在报告之前,应由微生物专业人员进行审核,审核过程中可结合样本来源、染色结果、形态学、培养条件等特征对结果的准确性进行评判。

结果报告:报告结果通常包括分值和一致性,需要专业人员进行审核和解释,以确保结果的可靠性。

质量控制:实验室需按照MALDI-TOF MS制造商的推荐和相关管理指南制定质控程序,包括仪器校准、室内质量控制和室间质量评价。

操作**:在操作过程中,应遵循生物**要求,特别是在处理高致病性微生物时,应采用适当的灭活方法,并在生物**柜中操作。

特殊情况处理:对于特殊类型的菌落,如黏液型菌落或干燥型菌落,可能需要特殊的处理方法以提高鉴定效果。

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